为检验非洲猪瘟“一检三鉴”试剂盒在一线检测中的适用性,进一步优化非洲猪瘟病毒分型检测方法,2026年11月11日,四川农业大学动物医学院猪病研究中心“绿盾智鉴”团队4名兽医专业在读硕士研究生——陈玺竹、王瑀珞、邓俊玲、易恒蔚在指导教师赵勤副教授带领下,前往四川省动物疫病预防控制中心,围绕非洲猪瘟检测方法开展学习交流。中心副主任陈斌、正高级兽医师邵靓博士及相关科室负责人接待团队并进行了指导。

四川省动物疫病预防控制中心承担全省动物疫病监测预警、实验室诊断、流行病学调查和突发重大疫情应急处置的技术工作,是全省非洲猪瘟常态化防控的主要技术支撑。团队此次带来的,是自己研制的“一检三鉴”三重TaqMan qPCR检测试剂盒。在省动物疫病预防控制中心实验室,团队成员观摩了非洲猪瘟检测的流程,从样品处理、核酸提取到扩增和结果判读,了解省级实验室的操作规范与质量控制要求。中心技术人员结合全省监测任务,介绍了日常检测的样本规模、常见问题以及分型结果在疫情处置中的用法。团队还就检测过程中的具体操作问题向中心老师请教。
学习交流中,“绿盾智鉴”团队负责人陈玺竹汇报了试剂盒的技术路线:比对114条非洲猪瘟病毒全基因组序列,筛选出2个特异性SNP位点和1段I177L基因保守区,据此设计3条TaqMan-MGB探针;针对非洲猪瘟病毒基因I型、II型野毒株与I177L基因缺失株同时流行的现状,这套体系在单管内通过三色荧光同步区分三类毒株,2小时内出具分型结果。与通用型qPCR只能判断阳性或阴性不同,该方案单样本试剂成本约5元,较市售同类产品降低37.5%以上,且无需另配设备,现有的96孔荧光定量PCR仪就能完成检测。目前,试剂盒已完成反应条件优化和小样本验证,相关技术已提交国家发明专利申请。但实验室里跑得通,不等于检测台上就好用——样本前处理是否繁琐、结果判读是否直观、不同批次试剂是否稳定,都要在真实样本和高通量检测中才看得清楚。
陈斌副主任结合全省非洲猪瘟监测网络运行实际,肯定了团队围绕防控需求开发检测方法的做法。他表示,省级中心既要完成监测任务,也要把成熟技术向市、县两级推广;分型产品能不能在基层用起来,关键在样本前处理是否简单、操作步骤是否清楚、结果判读是否直观。邵靓博士从实验室质量控制角度,对试剂盒在临床样本中的重复性和稳定性验证提出了具体建议。双方还就检测规范与培训如何配套、依托现有qPCR仪提升县级实验室分型能力等问题交换了意见。

此次交流让团队对“能用”与“好用”之间的距离有了更具体的认识。下一步,团队将按专家意见调整样本前处理流程,补充临床样本验证,完善操作说明,把这次收集到的意见逐条带回实验室落实。对4名在读兽医专业硕士生来说,问题在检测一线发现,办法也要在检测一线检验。力争形成一套基层用得起、用得好的非洲猪瘟精准分型检测方案,为生猪产业稳产保供和非洲猪瘟常态化防控提供检测技术支撑。